Визначення концентрації сперми за допомогою лічильної камери, ФЕК за стандартами
Мета: Оволодіти методами оцінки якості сперми.
Матеріали та обладнання: Свіжоодержана сперма, градуйовані мензурки, піпетки, мікроскопи, предметне і накривне скло, столики Морозова, скляні палички, 2,9-процентний розчин цитрату натрію, 3-процентний розчин ШС1, столики Пакенаса, меланжери, 0,1-процентний розчин метиленової синьки, 70-процентний спирт, вата, марлеві серветки, камери Горяєва.
Література: Яблонський В.А. Практичне акушерство, гінекологія та біотехнологія відтворення тварин з основами андрології. -К.: Мета,2002.- С.54-70.
Завдання 1
Визначення концентрації за допомогою лічильної камери Горяєва.
Методичні вказівки
Для зручності підрахунку сперми слід розрідити її і позбавити сперміїв рухливості. Сперму змішати у змішувачі з трипроцентним розчином натрію хлориду. Сперму бугая та барана змішати у еритроцитарному змішувачі, сперму жеребця і кнура - у лейкоцитарному. При цьому спермії втрачають рух і гинуть.
Заповнити таблицю.
Ступінь розбавлення сперми для підрахунку сперміїв у лічильній камері
|
Вид тварин |
Тип меланжера |
Мітка, до якої набирають сперму |
Мітка, до якої набирають трипроцентний розчин хлористого натрію |
Ступінь розбавлення |
|
Бугай |
Еритроцитарний |
|
|
|
|
Баран |
Еритроцитарний |
|
|
|
|
Кнур |
Лейкоцитарний |
|
|
|
|
Жеребець |
Лейкоцитарний |
|
|
|
Підрахунок концентрації сперміїв проводьте за формулою:
Н Д 400 100
С= ---------------------------
N p
де Н - кількість сперміїв у 80 малих квадратах; Д - ступінь розрідження сперми у змішувачі; 400 - число для переведення у квадратні (мілілітр), тому що в одному мілілітрі міститься 1000 мм3; 1000 - число для переведення в кубічні міліметри; N - кількість малих квадратів; Р - глибина камери в міліметрах, яка становить 0,1.
Заповнити таблицю
Кількість сперміїв у тварин різних видів у 1 мл. ( млн., млрд.)
|
Вид тварин |
Густа (понад) |
Середня ( від – до) |
Рідка (близько) |
|
Бугай |
|
|
|
|
Баран |
|
|
|
|
Кнур |
|
|
|
|
Жеребець |
|
|
|
Для більш прискореного визначення концентрації сперми використовують фотоелектроколориметр ФЕК - М. Методику підрахунку сперми за допомогою ФЕКа коротко описати.
Записати висновки
Описати набуті вміння і навички
Дайте відповіді на контрольні запитання
1. За якими показниками проводять мікроскопічну оцінку якості сперми?
2. Як проводять оцінку рухливості і густоти сперми?
3. При якій температурі найактивніше проявляється рухливість сперміїв?
4. Які мінімально допустимі показники за густиною та активністю сперміїв у бугая, барана, кнура та жеребця?
5. Який рух сперміїв вважається найкращим у свіжій спермі?